专性厌氧菌的培养方法

时间：2025-03-24

专性厌氧菌的培养方法

液体深层培养法：适用于要求不高的情况，可采用在液面覆盖石蜡或液体石蜡的培养方法，确保厌氧环境。抽真空培养法：通过真空环境排除氧气，适用于封闭培养管中，如Berker和Hungate的厌氧滚管法或液体培养法。 Balch的厌氧液体培养增压法：进一步提升厌氧条件，为厌氧微生物提供理想生长条件。

特别值得一提的是，液体培养基的处理方法，如疱肉培养基和梭菌增菌培养基，可以通过覆盖石蜡隔绝氧气。在灭菌后，石蜡能有效阻断空气中的氧气，加上还原性成分如铁粉或硫乙醇酸钠，进一步保障了厌氧环境的稳定性。自然馈赠的培养基有些培养基本身就具有厌氧性，无需额外设备。

不同的培养方法在培养不同需氧量的微生物时，要采用不同的方法：培养专性需氧菌：需要通气或震荡，保证充足的氧气。培养专性厌氧菌：需排除环境中的氧气，同时在培养基中添加还原剂，降低培养基中的氧化还原电位势，如使用厌氧产气包和厌氧培养袋（厌氧箱）。

培养厌氧菌的常见方法有两种：一是直接将培养基置于一个严格控制的无氧环境中，通常通过密封容器或特定的无氧设备实现；二是通过在培养基中加入还原性物质，比如降低培养基的氧化还原电势，然后在培养基表面覆盖凡士林或石蜡，防止空气进入，形成一个自我封闭的无氧环境。

疱肉培养基法/ 这是一种无需特殊设备的简易方法，只需将疱肉和肉汤封闭在凡士林覆盖的试管中，形成一个天然的厌氧环境。这种方法特别适合梭菌属的培育，如产气荚膜梭菌和肉毒梭菌。厌氧菌的培养是一门艺术，需要耐心和细心，每一个步骤都是与微生物世界的亲密对话。

放线菌属是一种在病灶和脓样物质中形成的微生物，其特点是在体内形成硫磺样颗粒，菌体多呈菊花状排列。在显微镜下观察，使用苏木紫伊红染色后，菌体呈紫色，而棒状末端则为红色。然而，人工培养这类微生物较为困难。

如果不是绝对厌氧菌可以使用烛缸法，通过燃烧蜡烛消耗掉培养容器中的大部分氧气。如果是绝对的厌氧菌，那么还是最好购买产生厌氧环境的厌氧袋。

培养箱可以都一样，好氧菌直接培养无需通二氧化碳，兼性厌氧根据需要适当通百分之五二氧化碳，厌氧菌、专性厌氧菌用厌氧罐处理后培养根据菌的需要通二氧化碳。

厌氧型指必需在无分子氧的环境中才能生长繁殖的一些微生物的总称。或称嫌气微生物、专性厌氧菌。一般生活在无氧环境，如生物体内、深层土壤或深层水域中。人工培养时需提供严格的厌氧条件，因为分子氧的存在对它们是有害的。